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淋巴毒素-α

干眼癥已成為眼科最常見的眼表疾病。全球干眼癥發(fā)病率約為5%至50%，而《中國干眼專家共識（2020年）》統(tǒng)計(jì)，我國干眼癥患者約3.6億人，發(fā)病率已高達(dá)21%至30%，平均每5人就有1名干眼患者，且呈現(xiàn)年輕化趨勢，甚至許多學(xué)齡前兒童也出現(xiàn)了干眼的癥狀。其中，21至50歲人群干眼癥發(fā)病率為22.5%，65歲以上人群干眼癥發(fā)病率為33.75%；女性高于男性，老年人高于青年人。

TNF-β (tumor necrosis factor β) 又稱淋巴毒素-α (lymphotoxin-alpha LT-α)，是腫瘤壞死因子超家族的成員，是一種由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子。TNF-β 激活 NF-κB 信號通路，誘導(dǎo)癌細(xì)胞增殖、侵襲。TNF-β 上調(diào)轉(zhuǎn)移相關(guān)基因的表達(dá)，促進(jìn)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化，刺激自身表達(dá)。TNF-β 介導(dǎo)多種炎癥、免疫刺激和抗病毒反應(yīng)。

Lymphotoxin α （LT-α），最近已成為一種潛在的用于干眼癥（Dry eye disease，DED）診斷的生物標(biāo)志物[1]。第一個(gè)報(bào)道是在 2018 年視覺研究協(xié)會(huì) （Association for Research in Vision） 和眼科年會(huì)上，一項(xiàng)大規(guī)模的臨床試驗(yàn)涉及 1168 名參與者（其中849 名為 DED 患者和 319 名為非干眼癥對照），在兩年之后對試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行了更新。在這項(xiàng)研究中，參與者通過使用眼表疾病指數(shù) （OSDI）眼部癥狀分量表，并收集他們的淚液在進(jìn)行其他測試前通過 LT-α-POC（i-ImmunDx） 檢測測量 LT-α 水平。有意思的是，干眼組 LT-α 水平 （0.33±2.82 ng/mL）顯著低于對照組 （0.99±3.69 ng/mL）（P＜0.01）。受試者工作特征 （ROC）曲線用于評估 LT-α 作為干眼癥診斷的生物標(biāo)志物，曲線下面積 （AUC） 為 0.765 （95%CI：0.731-0.800），支持 LT-α 作為生物標(biāo)志物用于干眼癥診斷。

有趣的是，雖然一部分移植物抗宿主?。℅VHD ）患者表現(xiàn)出升高LT-α水平，由 Jing M. 及其同事進(jìn)行的研究發(fā)現(xiàn)眼淚中的LT-α 濃度在慢性眼 GVHD （oGVHD） 患者為0.093±0.090 ng/mL，而對照受試者為（0.54±2.84 ng/mL）。這一觀察結(jié)果與 DED 的臨床研究結(jié)果一致，從而加強(qiáng)了 LT-α 作為用于干眼癥診斷的可靠生物標(biāo)志物。

在這種情況下，LT-α POC 淚液試驗(yàn)作為方便的即時(shí)免疫測定方法（免疫層析法），不僅可用于 DED的診斷和分級，也可以為個(gè)性化治療提供指導(dǎo)。

參考文獻(xiàn)

[1] Li CR. Role of lymphotoxin alpha as a new molecular biomarker in revolutionizing tear diagnostic testing for dry eye disease. Int J Ophthalmol 2023;16(11):1883-1889.

產(chǎn)品介紹

產(chǎn)品名稱	貨號	推薦用途
鼠抗LTA單抗MAb352	10207	標(biāo)記/包被
鼠抗LTA單抗MAb353	10208	劃線/檢測
鼠抗LTA單抗MAb354	10209	劃線/檢測
鼠抗LTA單抗MAb355	10210	標(biāo)記/包被
重組LTA蛋白	60104	質(zhì)控

應(yīng)用數(shù)據(jù)-層析平臺

針對LTA檢測，我們篩選出了適用于層析平臺的最優(yōu)推薦配對。

推薦配對1：

劃線	C線	羊抗鼠	標(biāo)記	鼠抗LTA單抗MAb352
	T線	鼠抗LTA單抗MAb353

參考標(biāo)準(zhǔn)曲線如下圖：

蛋白濃度pg/mL	C值	T值
200	2201	1695
100	2399	1095
50	2345	681
25	2327	435
10	2393	319
0	2406	132

推薦配對2：

劃線	C線	羊抗鼠	標(biāo)記	鼠抗LTA單抗MAb354
	T線	鼠抗LTA單抗MAb355

參考標(biāo)準(zhǔn)曲線如下圖：

蛋白濃度pg/mL	C值	T值
200	2201	1695
100	2399	1095
50	2345	681
25	2327	435
10	2393	319
0	2406	132

應(yīng)用數(shù)據(jù)-化學(xué)發(fā)光AE平臺

針對LTA檢測，我們篩選出了適用于化學(xué)發(fā)光平臺的最優(yōu)推薦配對。

推薦配對1：

反應(yīng)模式：50 μL 抗原+60 μL 鼠抗LTA單抗MAb353-吖啶酯+60 μL 生物素化鼠抗LTA單抗MAb352，37℃ 孵育 15min+30 μL 磁珠 孵育15min，清洗，檢測。

推薦濃度：	鼠抗LTA單抗MAb353-吖啶酯	300-1000 ng/mL
	生物素化鼠抗LTA單抗MAb352	300-1000 ng/mL
	磁珠	1 mg/mL

我們對該配對進(jìn)行了相關(guān)分析性能評估，在AE化學(xué)發(fā)光平臺的校準(zhǔn)曲線如圖 1所示，通過使用內(nèi)部抗原作為校準(zhǔn)品進(jìn)行評測，結(jié)果顯示該模型的線性范圍為10-200 pg/mL，最低檢出限LoB為5 pg/mL。

推薦配對2：

反應(yīng)模式：50 μL 抗原+60 μL 鼠抗LTA單抗MAb354-吖啶酯+60 μL 生物素化鼠抗LTA單抗MAb355，37℃ 孵育 15min+30 μL 磁珠 孵育15min，清洗，檢測。

推薦濃度：	鼠抗LTA單抗MAb354-吖啶酯	300-1000 ng/mL
	生物素化鼠抗LTA單抗MAb355	300-1000 ng/mL
	磁珠	1 mg/mL

我們對該配對試劑進(jìn)行了相關(guān)分析性能評估，在AE化學(xué)發(fā)光平臺的校準(zhǔn)曲線如圖 2所示，通過使用內(nèi)部抗原作為校準(zhǔn)品進(jìn)行評測，結(jié)果顯示該模型的線性范圍為10-200 pg/mL，最低檢出限LoB為5 pg/mL。